Adenovirus rask test-nesesekresjon

Tiltenkt bruk:

SARS-CoV-2 nukleinsyretestsett brukes for kvalitativ påvisning av nukleinsyre av COVID-19 i nasofaryngeale vattpinner, orofaryngeale vattpinner og sputum. Testresultatene gir molekylær diagnosegrunnlag for infeksjon eller mistenkte pasienter, og skal ikke brukes som eneste kriterium for klinisk diagnose.

Materialer:

Test prosedyre:

A. Prøveforberedelse

Ekstrahert RNA er startmaterialet for SARS-CoV-2 nukleinsyretestsettet.

Viktig: Hver nukleinsyreekstraksjonsprosedyre må utføres samtidig med én positiv kontroll (40 μL, fortynnes med sterile saltvannsløsninger/PBS til ønsket volum) og én negativ kontroll (40 μL, fortynnes med sterile saltvannsløsninger/PBS til ønsket volum).

Det anbefales å bruke følgende kommersielle nukleinsyreekstraksjonssett: PureLinkTM Viral RNA/DNA Mini Kit (Invitrogen); Viralt RNA Mini-sett (QIAGEN); TIANamp Hi-DNA/RNA-sett (TIANGEN);

B. Oppsett av reaksjonsblanding

1. Alle reagenser og prøver bør tines fullstendig, blandes fullstendig og sentrifugeres kort ved romtemperatur (omtrent område 18 til 25 grader) før bruk.

2. Forbered det nødvendige volumet av reaksjonsblandingen i et mikrosentrifugerør av polypropylen med passende størrelse.

3. Pipetter 25 µL av reaksjonsblandingen inn i hver påkrevd brønn i en passende optisk 96-brønnreaksjonsplate eller et passende optisk reaksjonsrør.

C. Maltilføyelse

1. Tilsett 5 μL ekstrahert RNA fra prøver/positiv kontroll/negativ kontroll. Det totale volumet er 30 μL.

2. Bland prøvene og kontrollene grundig med reaksjonsblandingen ved å pipettere opp og ned/Vortex.

3. Lukk 96-brønnreaksjonsplaten med passende lokk eller optisk klebende film og reaksjonsrørene med passende lokk.

4. Sentrifuger 96-brønnreaksjonsplaten i en sentrifuge med en mikrotiterplaterotor i 30 sekunder ved ca. 2500 rpm.

D. Programmering av sanntids PCR-instrumentet

For grunnleggende informasjon om oppsett og programmering av de forskjellige sanntids PCR-instrumentene, se brukermanualen til det respektive instrumentet. Analysen er optimert for ABI7500 sanntids PCR-systemet. PCR-kjøringen utføres med syklusforhold som beskrevet i tabellen nedenfor.

Definer fluorescensdetektorene

*Vennligst sett den interne fluorescensreferansen til instrumentet til "Ingen", for eksempel: For instrumenter i ABI-serien, sett "Passiv referanse" til "Ingen".

E. Dataanalyse

Vennligst still inn analyseparametrene og analyser dataene i henhold til bruksanvisningen til de relevante instrumentene.

Ta ABI 7500 som et eksempel:

Baseline bør settes til et område som eliminerer bakgrunnsfluorescensen funnet i de tidlige syklusene av amplifikasjon, men som ikke overlapper området der amplifikasjonssignalene stiger over bakgrunnen (Startverdi:3~10; Sluttverdi: {{2} }). Syklusterskelen (Ct) bør være i bunnen av den eksponentielle fasen. Klikk "Analyse" for å få analyseresultatet automatisk, og les deteksjonsresultatet i "Rapport"-vinduet.

Populære tags: adenovirus rask test - nasal sekresjon, Kina, leverandører, produsenter, fabrikk, bulk